FAQ

Возможна ли одновременная постановка разных тест-систем (на разные инфекции) в амплификаторах серии ДТ

Возможна при условии совпадения программы амплификации.

Более подробную информацию Вы можете узнать в СКП

8 800 200 75 15, hotline@dna-technology.ru

Что такое «НД», что делать при его возникновении

НД - недостоверный результат (отсутствие значений Ср по каналам флуоресценции, задействованным в анализе)

Возможные причины:
- присутствие ингибиторов;
- неверное выполнение протокола анализа;
- несоблюдение температурного режима амплификации и т.д.

Внимание! При возникновении «НД» в протоколах вам необходимо обратиться в службу клиентской поддержки (8 (800) 200-75-15 (звонок по России бесплатный), +7 (495) 640-16-93 (для стран СНГ и зарубежья, звонок платный), по электронной почте hotline@dna-technology.ru.)

Как часто необходимо ставить контроли

«К+» (положительный контроль) и «К-» (отрицательный контроль) – в каждую постановку для всех наборов реагентов (исключение - некоторые наборы для определения генетических полиморфизмов – только «К-»).

Стандарты (СТ1 и СТ2) – при использовании наборов реагентов для количественного определения ВИЧ/гепатиты В и С – в трех повторах каждый (!)

Минимальная частота постановки СТ1 и СТ2 - 1 раз для каждой новой серии наборов, взятых в работу (ПО позволяет загружать в текущий протокол исследований стандарты из предыдущих постановок в пределах одной серии реагентов)

КВМ – рекомендуется использовать периодически для исключения ошибок преаналитического этапа, особенно при отработке новой системы выделения.

Как осуществляется контроль ПЦР

Все наборы реагентов производства «ДНК-Технология» имеют ВК (внутренний контроль), входящий в состав реакционной смеси для амплификации – контроль прохождения реакции амплификации.

Специальные контроли:
- Калибраторы и стандарты.
- В некоторых наборах реагентов (генетика, «HLA-DRB1»,) в качестве внутреннего контроля используется выделенная ДНК-человека.
- КВМ – контроль взятия материала – рекомендуется использовать для оценки содержания клеток эпителия человека в образце и для определения количества геномной ДНК человека.

«К-» (отрицательный контроль) – контроль контаминации – проводится с этапа выделения.

«К+» (положительный контроль) - контроль корректности работы набора регентов, используемого для амплификации.

Поддерживает ли оборудование (амплификаторы серии ДТ) «ДНК-Технологии» формат HRM

Формат HRM (High Resolution Melt) – высокочувствительный анализ кривых плавления - НЕ поддерживается на оборудовании «ДНК-Технологии».

Возможна ли реализация анализа FEP на оборудовании «ДНК-Технология»

Амплификаторы серии ДТ могут реализовать анализ FEP при условии специально разработанной программы анализа данных (ПО «ДНК-Технология» НЕ позволяет реализовать анализ FEP)

Какие виды ПЦР-анализа могут быть реализованы на оборудовании «ДНК-Технология»

Качественный анализ (три способа детекции результатов):
- в режиме «реального времени»

Количественный анализ - формат детекции: в режиме «реального времени»
- для определения вирусной нагрузки (гепатит С, В, ВИЧ) – количественный анализ со стандартами (СТ1 – 1х106, СТ2 – 3х103);
- для исследования биоценозов (технологии «Фемофлор®» и «Андрофлор®», «Энтерофлор Дети») - нормировка на общую бактериальную массу (ОБМ) - относительный количественный анализ;
- для определения вирусной нагрузки ВПЧ (наборы реагентов серии «HPV-Квант») - нормировка на количество эпителиальных клеток (КВМ) - относительный количественный анализ

Генотипирование человека/микроорганизмов - детекции результатов в режиме «реального времени» с анализом кривых плавления;

Мультиплексный анализ - детекция результатов в режиме «реального времени»:
- выявление трех мишеней + внутренний контроль (ВК) в одной пробирке - для 4-канальных приборов серии «ДТ» (с использованием наборов реагентов «ДНК-Технология» или наборов реагентов иных производителей, адаптированных к приборам серии «ДТ»)
- выявление четырех мишеней + ВК в одной пробирке - для 5-канальных приборов серии «ДТ» (с использованием наборов реагентов иных производителей, адаптированных к приборам серии «ДТ»)

Какие дезинфицирующие средства и как часто используются в ПЦР-лаборатории

Обработку помещений проводят в соответствии с требованиями:
СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III–IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней» и СП 1.3.2885-11 Дополнения и изменения № 2 к СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III–IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней» и СП 1.3.3118-13 «Безопасность работы с микроорганизмами I–II групп патогенности (опасности)»

Рекомендуемые дез. средства представлены в Методических указаниях 2009 г. (МУ 1.3.2569-09) и Федеральных клинических рекомендациях по выбору химических средств дезинфекции и стерилизации для использования в медицинских организациях. М., 2015
(см. сайт www.dna-technology.ru раздел «Информация. Нормативная документация») и включают:
- 0,2% раствор «Хлормисепт люкс»
- 0,5%-1%-ный раствор «Мистраль»
- 0,5% «Лизафин»
- 1-3% раствор «Диабак»
- 0,5-2% раствор «Велтолен»
- 0,2% раствором «ДП-2Т» для ежедневной влажной уборки помещения в конце рабочего дня, ежемесячной генеральной уборки и для деконтаминации.

Внимание! Не рекомендуется использовать хлорсодержащие средства во время работы по выделению нуклеиновых кислот и амплификации, так как это может привести к ингибированию ПЦР
- Рабочие помещения должны подвергаться ежедневному обеззараживанию ультрафиолетовым излучением в конце рабочего дня. Необходимо использовать УФ-лампы открытого типа (Руководство МЗ РФ, утвержденное главным санитарным врачом РФ Онищенко Г.Г 04.03.2004 Р.3.5.1904-04 «Использование ультрафиолетового бактерицидного излучения для обеззараживания воздуха в помещениях»

Какие перчатки должны быть использованы для работы в ПЦР-лаборатории

Перчатки медицинские неопудренные
Внимание! Использование опудренных тальком перчаток приводит к ингибированию ПЦР

Какие дозаторы необходимы для работы в ПЦР-лаборатории

Дозаторы лабораторные механические или электронные одноканальные переменного объема:
- Для выделения ДНК/РНК – с фильтром, объемом 2-20мкл, 20-200 мкл, 100-1000 мкл
- Для приготовления реакционной смеси (ОТ и ПЦР) – без фильтра, объемом 2-20 мкл, 20-200 мкл, 100-1000 мкл
- Для амплификации – с фильтром, объемом 0,5-10 мкл, 20-200 мкл.
- Дозаторы, используемые в лицензированной ПЦР-лаборатории, должны быть включены в Государственный реестр средств измерений (ФГИС "АРШИН"):
https://fgis.gost.ru/fundmetrology/registry/4
- Полный перечень расходных материалов, рекомендуемый для функционирования ПЦР-лаборатории, представлен в Методических указаниях 2009 г (МУ 1.3.2569-09) (см. сайт www.dna-technology.ru, раздел «Информация. Нормативная документация»)

Вы здесь

Страницы