НЕ рекомендовано, особенно при работе с количественными тест-системами (Фемофлор, Квант) и наборами реагентов для выявления, типирования и определения количества ВИЧ и гепатиты.
Комплект реагентов для выделения ДНК «ПРОБА-РАПИД» - для работы с соскобами, мочой, слюной и т.д., содержащими незначительное количество примесей и ингибиторов.
В случае материала, содержащего значительное количество потенциальных ингибиторов (гной, кровь, соскобы урогенитального тракта у мужчин, а также при работе с сывороткой и плазмой крови, биоптатами, ликвором, калом и т.д., рекомендуется использование сорбентного метода (комплекты реагентов для выделения ДНК «ПРОБА-ГС», «ПРОБА-ГС-ПЛЮС») или выделения на основе преципитации (комплекты реагентов для выделения ДНК/РНК «ПРОБА-НК» и «ПРОБА-НК-ПЛЮС»).
При работе с РНК-содержащими вирусами – только «ПРОБА-НК».
Для генетических исследований с использованием цельной периферической крови - «ПРОБА-РАПИД-ГЕНЕТИКА», «ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА».
Проба-НК-Фет комплект реагентов для выделения фетальной ДНК из крови матери (только Пренатальная диагностика)
Обратите внимание, что:
- «ПРОБА-РАПИД-ГЕНЕТИКА» и «ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА» отличаются по составу от сходных по названию «ПРОБЫ-РАПИД» и «ПРОБЫ-ГС/ГС-ПЛЮС», поэтому не являются взаимозаменяемыми.
- «ПРОБА-ГС-ПЛЮС» и «ПРОБА-НК-ПЛЮС» одинаковы по составу с «ПРОБОЙ-ГС» и «ПРОБОЙ-НК».
Маркировка «ПЛЮС» указывает на наличие большего объема буфера для растворения и возможности получить больший объем препарата ДНК, поэтому данные реагенты рекомендуются для работы с тест-системами Фемофлор, Квант.
(см. инструкцию на сайте www.dna-technology, раздел Инструкции. Реагенты)
Экспресс-метод выделения ДНК:
- Комплект реагентов для выделения ДНК «ПРОБА-РАПИД»
- Комплект реагентов для выделения ДНК «ПРОБА-РАПИД-ГЕНЕТИКА»
Сорбентный метод выделения ДНК:
- Комплект реагентов для выделения ДНК «ПРОБА-ГС»
- Комплект реагентов для выделения ДНК «ПРОБА-ГС-ПЛЮС»
- Комплект реагентов для выделения ДНК «ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА»
Метод выделения ДНК/РНК на основе преципитации:
- Комплект реагентов для выделения ДНК/РНК «ПРОБА-НК»
- Комплект реагентов для выделения ДНК/РНК «ПРОБА-НК-ПЛЮС»
Возможна при условии совпадения программы амплификации.
Более подробную информацию Вы можете узнать в СКП
8 800 200 75 15, hotline@dna-technology.ru
НД - недостоверный результат (отсутствие значений Ср по каналам флуоресценции, задействованным в анализе)
Возможные причины:
- присутствие ингибиторов;
- неверное выполнение протокола анализа;
- несоблюдение температурного режима амплификации и т.д.
Внимание! При возникновении «НД» в протоколах вам необходимо обратиться в службу клиентской поддержки (8 (800) 200-75-15 (звонок по России бесплатный), +7 (495) 640-16-93 (для стран СНГ и зарубежья, звонок платный), по электронной почте hotline@dna-technology.ru.)
«К+» (положительный контроль) и «К-» (отрицательный контроль) – в каждую постановку для всех наборов реагентов (исключение - некоторые наборы для определения генетических полиморфизмов – только «К-»).
Стандарты (СТ1 и СТ2) – при использовании наборов реагентов для количественного определения ВИЧ/гепатиты В и С – в трех повторах каждый (!)
Минимальная частота постановки СТ1 и СТ2 - 1 раз для каждой новой серии наборов, взятых в работу (ПО позволяет загружать в текущий протокол исследований стандарты из предыдущих постановок в пределах одной серии реагентов)
КВМ – рекомендуется использовать периодически для исключения ошибок преаналитического этапа, особенно при отработке новой системы выделения.
Все наборы реагентов производства «ДНК-Технология» имеют ВК (внутренний контроль), входящий в состав реакционной смеси для амплификации – контроль прохождения реакции амплификации.
Специальные контроли:
- Калибраторы и стандарты.
- В некоторых наборах реагентов (генетика, «HLA-DRB1»,) в качестве внутреннего контроля используется выделенная ДНК-человека.
- КВМ – контроль взятия материала – рекомендуется использовать для оценки содержания клеток эпителия человека в образце и для определения количества геномной ДНК человека.
«К-» (отрицательный контроль) – контроль контаминации – проводится с этапа выделения.
«К+» (положительный контроль) - контроль корректности работы набора регентов, используемого для амплификации.
Формат HRM (High Resolution Melt) – высокочувствительный анализ кривых плавления - НЕ поддерживается на оборудовании «ДНК-Технологии».
Амплификаторы серии ДТ могут реализовать анализ FEP при условии специально разработанной программы анализа данных (ПО «ДНК-Технология» НЕ позволяет реализовать анализ FEP)
Качественный анализ (три способа детекции результатов):
- в режиме «реального времени»
Количественный анализ - формат детекции: в режиме «реального времени»
- для определения вирусной нагрузки (гепатит С, В, ВИЧ) – количественный анализ со стандартами (СТ1 – 1х106, СТ2 – 3х103);
- для исследования биоценозов (технологии «Фемофлор®» и «Андрофлор®», «Энтерофлор Дети») - нормировка на общую бактериальную массу (ОБМ) - относительный количественный анализ;
- для определения вирусной нагрузки ВПЧ (наборы реагентов серии «HPV-Квант») - нормировка на количество эпителиальных клеток (КВМ) - относительный количественный анализ
Генотипирование человека/микроорганизмов - детекции результатов в режиме «реального времени» с анализом кривых плавления;
Мультиплексный анализ - детекция результатов в режиме «реального времени»:
- выявление трех мишеней + внутренний контроль (ВК) в одной пробирке - для 4-канальных приборов серии «ДТ» (с использованием наборов реагентов «ДНК-Технология» или наборов реагентов иных производителей, адаптированных к приборам серии «ДТ»)
- выявление четырех мишеней + ВК в одной пробирке - для 5-канальных приборов серии «ДТ» (с использованием наборов реагентов иных производителей, адаптированных к приборам серии «ДТ»)